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旅顺历史比较悠久，五千年前就有人类居住，汉代时属沓氏县，东晋时名“马石津”，隋唐时谓“都里镇”。
明朝洪武四年，明太祖朱元璋派马云、叶旺两将军率军队从山东蓬莱乘船跨海在此登陆收复辽东，因海上旅途一帆风顺，遂将狮子口改名旅顺口，一直沿用至今。
1880年，清政府在此兴办北洋水师，建军港、修炮台、筑船坞、扎营盘，旅顺口成为军事要塞，旅顺军港成为当时世界上著名的五大军港之一。
1894 年的中日甲午战争和1904年的日俄战争，旅顺作为主战场，在中国和世界历史上留下了重要的一页。旅顺曾被沙俄侵占7年，遭日本奴役40年，在长期的殖民统治中饱经沧桑，素有“一个旅顺口，半部近代史”之说。
1960年2月20日与大连合并成为旅大市，1981年改为大连市，旅顺口成为其辖区之一。1996年7月1日，旅顺实现局部对外开放。